本生知識點(diǎn)—ELISA樣本分析及實(shí)驗原理

　　elisa試劑盒實(shí)驗原理：

　　試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中產(chǎn)品水平。用純化的其抗體包被微孔板，制成固相抗體。往包被單抗的微孔中依次加入本產(chǎn)品，再與HRP標記的其抗體結合，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物，經(jīng)過(guò)*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成終的黃色。顏色的深淺和樣品呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長(cháng)下測定吸光度(OD值)，通過(guò)標準曲線(xiàn)計算樣品中產(chǎn)品的濃度。

　　elisa試劑盒種屬：人，大鼠，小鼠，雞，鴨，魚(yú)，貓，馬，豬，兔，倉鼠，豚鼠，裸鼠，植物等elisa試劑盒。

　　ELISA樣本分析：

　　1.回溫平衡：

　　在加樣之前約半小時(shí)左右，把試劑盒從冰箱中取出，放置在室溫下進(jìn)行平衡，平衡到用手握住試劑瓶感覺(jué)到不涼為止。如果時(shí)間匆忙的話(huà)也可以利用手握住試劑瓶進(jìn)行快速回溫。

　　2.反應時(shí)間：

　　盡量把時(shí)間控制在需要的反應時(shí)間，如果時(shí)間比較緊迫的話(huà)也可以把時(shí)間稍微延長(cháng)幾分鐘，但不宜太長(cháng)。顯色時(shí)間可根據顏色深淺進(jìn)行調整。

　　3.加樣：

　　取出相應數量的微孔板放置在板架上，然后再對板孔進(jìn)行編號，再對需要稀釋的抗體或酶標記物進(jìn)行稀釋。在板孔的前六個(gè)孔內分別加入標準品1-6，然后在剩下的板孔內加入樣品分析液。然后再在每孔內加入其余需要加入的液體。蓋上蓋板膜以后小幅度振蕩，然后放置在相應的環(huán)境中進(jìn)行反應。如是25℃環(huán)境反應，則可放置在空調房?jì)冗M(jìn)行反應;如果是37℃環(huán)境下反應，則必須放置在37℃恒溫培養箱里進(jìn)行反應，如果是4℃環(huán)境下反應，則必須放置在2-8度冰箱里進(jìn)行培養。

　　4.洗板：

　　把板內液體甩干，加入稀釋好的洗液250ul/孔，靜置10s或稍作振蕩后甩掉孔內液體，再次加入洗液，以此重復3-4遍，洗完以后利用吸水紙把孔內液體充分拍干后進(jìn)行下一步操作，如果孔內有氣泡，則利用干凈的槍頭刺破。

　　5 結束實(shí)驗:

　　把加樣槍全部調到zui大量程,試劑盒放入冰箱,試管及離心管進(jìn)行清洗,關(guān)閉不用的儀器.

　　ELISA試劑盒 本生一直視質(zhì)量控制為企業(yè)的生命，追求企業(yè)競爭力的不斷提升。公司在經(jīng)營(yíng)中始終秉承：遵紀守法，嚴于律己，寬仁以待，敢于承擔的企業(yè)精神作為標準，以過(guò)硬的質(zhì)量和優(yōu)良的服務(wù)來(lái)維護和拓展市場(chǎng)，較大限度的滿(mǎn)足客戶(hù)的需求。與客戶(hù)的共贏(yíng)，是我們的發(fā)展目標。本生!您信任的合作伙伴。我們愿與您真誠合作，共創(chuàng )美好的未來(lái)。