BUNSEN資訊| ELISA試劑盒的空白孔設置及注意事項

　　ELISA試劑盒的空白孔設置步驟如下：

　　1. 空氣空白\水空白：一般是用于儀器調零的,所有孔數值減掉該孔數值。

　　2.底物空白：一般是用于防止底物弱顯色所造成的讀數偏高，同樣所有孔數值減掉該孔數值(只加底物和終止液)

　　3. 酶空白：一般在2步法實(shí)驗中使用，主要是看酶是否和板有非特異性結合的，一般不做這個(gè) 。

　　ELISA試劑盒空白孔一般設一個(gè)，這是為了減除顯色液的OD值。而陰性和陽(yáng)性標準品最好是設2個(gè)復孔，雖然有點(diǎn)浪費，但為了確保實(shí)驗的可靠性，我認為還是很有必要的。ELISA試劑盒空白孔加什么?一般兩個(gè)做法，看個(gè)人習慣或者說(shuō)看你們實(shí)驗室的習慣：

　　1，什么都不加，然后那個(gè)孔按照操作流程來(lái)做，這個(gè)說(shuō)法的根據就是空白，也就是什么都沒(méi)有。

　　2，加樣本稀釋液，然后按照操作流程來(lái)做。這個(gè)做法的根據就是只要不含陽(yáng)性物質(zhì)就算是空白的，加入樣本稀釋液的目的是為了使這個(gè)孔除了在沒(méi)有陽(yáng)性物質(zhì)上其他的都與其他孔一致。

　　ELISA試劑盒注意事項：

　　1、血清標本可按常規方法采集，應注意避免溶血，紅細胞溶解時(shí)會(huì )釋放出具有過(guò)氧化物酶活性的物質(zhì)，以HRP為標記的ELISA測定中，溶血標本可能會(huì )增加非特異性顯色。

　　2、 血清標本宜在新鮮時(shí)檢測。如有細菌污染，菌體中可能含有內源性HRP，也會(huì )產(chǎn)生假陽(yáng)性反應。如在冰箱中保存過(guò)久，其中的可發(fā)生聚合，在間接法ELISA中可使本底加深。

　　3、一般說(shuō)來(lái)，在5天內測定的血清標本可放置于4℃，超過(guò)一周測定的需低溫冰存。凍結血清融解后，蛋白質(zhì)局部濃縮，分布不均，應充分混勻宜輕緩，避免氣泡，可上下顛倒混和，不要在混勻器上強烈振蕩?；鞚峄蛴谐恋淼难鍢吮緫入x心或過(guò)濾，澄清后再檢測。反復凍融會(huì )使抗體效價(jià)跌落，所以測抗體的血清標本如需保存作多次檢測，宜少量分裝冰存。保存血清自采集時(shí)就應注意無(wú)菌操作，也可加入適當防腐劑。

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