本生選購指南：如何選擇PCR實(shí)驗耗材?

　　關(guān)于其基因組的測序和信息分析，早在兩年前就由華大基因、浙江大學(xué)和中國科學(xué)院的科學(xué)家團隊共同合作完成。后續功能的驗證主要包括PCR檢測、ChIP、IP、IHC、IF、FISH等手段。而其中就簡(jiǎn)單的方式就是PCR驗證，那關(guān)于PCR實(shí)驗有哪些影響因素呢?

　　我們一般想到的可能是獲取的DNA/RNA質(zhì)量、反轉錄的效率、引物的特異性乃至DNA聚合酶的保真度、擴增長(cháng)度等問(wèn)題，但很少有人會(huì )想到耗材的選擇，可能也會(huì )影響您的實(shí)驗結果。那么關(guān)于PCR實(shí)驗耗材我們改如何選擇呢?

　　首先需要明確的是我們做的是哪種PCR實(shí)驗。根據檢測方法的不同，PCR實(shí)驗分為普通PCR法和熒光定量PCR法，前者一般是終點(diǎn)PCR跑膠法測定，所以在選擇耗材時(shí)需要關(guān)注的主要是耗材本身的導熱性和密封性;而后者是實(shí)時(shí)檢測熒光信號，除了導熱性和密封性外，對透光性和避光性也有所要求。換句話(huà)而言，可以做熒光定量PCR的耗材一定可以來(lái)做普通PCR，反之，效果卻會(huì )差很多!

　　確定好了實(shí)驗類(lèi)型，我們就可以選擇耗材了，如前面所述，我們知道了密封性、導熱性、透光性、避光性等因素是我們需要關(guān)注的，那為什么要關(guān)注這些呢?

　　一、密封性

　　密封性越好，產(chǎn)物的揮發(fā)越少，得到的產(chǎn)物就越多同時(shí)氣溶膠的產(chǎn)生也越少，對于下一輪實(shí)驗的污染也就越少，也就意味著(zhù)假陽(yáng)性的產(chǎn)生率越低。

　　二、導熱性

　　導熱性越好越均一，PCR的速度就越快，準確度也越高。

　　三、透光性

　　這主要是對于熒光定量而言，我們知道它是一種實(shí)時(shí)定量的方式，那么耗材本身的透光性就直接關(guān)系到我們檢測到的熒光信號多少，如果選擇耗材透光性不足，本該檢測到的信號檢測不到，那就會(huì )造成我們對結果的誤判。

　　四、避光性

　　這也是針對熒光定量而言的，同上面的因素，如果我們在整個(gè)實(shí)驗過(guò)程中沒(méi)注意避光，帶有熒光的試劑過(guò)度被消耗，那*直接就會(huì )影響我們實(shí)驗的擴增效率，導致不準確的結果產(chǎn)生。

　　PCR單管

　　采用的一次注塑成型技術(shù)，超薄設計，熱傳導快，視窗比平面低，不易被劃擦，管子密封性更好，近乎零蒸發(fā)，減少了氣溶膠的污染，*大程度避免了假陽(yáng)性的產(chǎn)生。熒光系列，蓋子高度透光，可適用于頂讀與低讀。

　　八聯(lián)管(適用普通PCR)

　　低于平面的高透視窗設計，可以*大程度避免被劃擦。100%進(jìn)口的原材料的使用使得管壁具有均一的平整和穩定的不黏壁性，確保了樣品處理和吸取時(shí)的精準度。

　　PCR板

　　不同于市面上其他廠(chǎng)家底部注塑的方式，注塑點(diǎn)是在板面上的孔與孔的交叉處，這樣使得PCR板的管底與PCR儀的接觸更好，同時(shí)采用純度高達99.9%的聚丙烯，超薄設計、壁厚一致均勻的工藝使得熱傳導精確、控溫準確、有效減少了實(shí)驗循環(huán)時(shí)間。

　　RNasin 能夠保護mRNA 的完整，有利于提高轉錄及翻譯的效率，同時(shí)避免了使用有機化合物抑制劑可能帶來(lái)的影響。

　　規格：30μl(40U/μl)

　　RNasin 是存在于人胎盤(pán)中的一種特異性核糖核酸酶(RNase)抑制劑其本質(zhì)是蛋白質(zhì)，分子量為51,000 Da，等電點(diǎn)pH值為4.7。

　　RNasin能夠特異地與RNase 以非共價(jià)鍵結合形成復合體從而使RNase 失活。RNasin在緩沖液為0-0.5M NaCl，pH5-8的條件下具有活性，pH7.8 時(shí)活性最高。

　　RNasin 能夠保護mRNA 的完整，有利于提高轉錄及翻譯的效率，同時(shí)避免了使用有機化合物抑制劑可能帶來(lái)的影響。

　　產(chǎn)品特點(diǎn)：

　　RNasin 能夠抑制真核生物的RNaseA、B、C 和人胎盤(pán)RNase 的活性。

　　該產(chǎn)品不抑制RNase H，S1核酸酶，SP6，T7 和T3RNA聚合酶，MV 或M-MLV 反轉錄酶，Taq DNA 聚合酶，

　　RNase T1，不影響后繼的反轉錄及蛋白質(zhì)翻譯過(guò)程。

　　緩沖體系需要有1 mM DTT 存在，活性pH 范圍寬廣。

　　產(chǎn)品應用：

　　用在有潛在RNase 污染的地方。

　　在cDNA合成、體外轉錄系統、翻譯系統中保護mRNA。

　　可以增加多核糖體的活性、產(chǎn)量;利于病毒的體外復制。

　　用于制備無(wú)RNase 的蛋白產(chǎn)品，如抗體。

　　本生選購指南：如何選擇PCR實(shí)驗耗材?本生生物公司供應：ELISA試劑盒,動(dòng)物血清,熒光定量PCR耗材,移液器吸嘴,微量離心管,進(jìn)口凍存管,細胞培養皿,培養板,培養瓶,進(jìn)口吸頭,儀器及手套,色譜耗材,針頭過(guò)濾器等。