本生2.0ml凍存管能耐受-196℃低溫的聚丙烯制成,有硅膠環(huán)以保證密封,所有可立凍存管底部經(jīng)特殊設計,可固定在凍存架或托盤(pán)上供單手操作,無(wú)菌,無(wú)熱源認證。
2.0ml凍存管樣品的制備:
1、培養細胞蛋白質(zhì)樣品的制備:
(1)在合適的鹽濃度下,應保持蛋白質(zhì)的最大溶解性和可重復性。
(2)選擇合適的表面活性劑和還原劑,破壞所有非共價(jià)結合的蛋白質(zhì)復合物和共價(jià)鍵二硫鍵,使其形成一個(gè)各自多肽的溶液。
(3)盡量去除核酸,多糖,脂類(lèi)等干擾分子。
(4)防止蛋白質(zhì)在樣品處理過(guò)程中的人為的修飾,制備過(guò)程應在低溫下進(jìn)行,以避免細胞破碎釋放出的各種酶類(lèi)的修飾(建議加入合適的蛋白酶抑制劑)
(5)樣品建議分裝成合適的量,然后冷凍干燥或直接以液體狀態(tài)置-80℃中保存,但要注意不要反復凍融。
2、組織樣品的制備:
手術(shù)切除的組織塊迅速置于預冷的0.95生理鹽水中,漂洗數次,以清潔表面的血跡,將組織稱(chēng)量后切成幾個(gè)較小的組織塊放入機戒組織勻漿器中,按組織凈重,加入相應體積的裂解液進(jìn)行勻漿,離心收集上清加入Laemmli樣品緩沖液強力混勻,樣品置100度的水浴箱水浴加熱3-5分鐘,10000g離心10分鐘,取上清液,將其轉入另一潔凈的試管中,至此,電泳樣品已準備就緒。