根據不同的分類(lèi)標準,酶標板有著(zhù)不同的分類(lèi)。一、根據孔數,可分為96孔、48孔等,由于酶標板主要是配合酶標儀用,目前市面上的酶標儀最多為96孔,因此最為常用的酶標板96孔。
根據酶標板與蛋白和其它分子結合能力的不同,又分為高結合力、中結合力和氨基化等。
1、高結合力
此種酶標板,表面經(jīng)處理后,其蛋白結合能力大大增強,可達300~400ngIgG/cm2,主要結合的蛋白分子量>10kD。使用該類(lèi)酶標板可提高敏感性,并可相對減少包被蛋白的濃度和用量,不足之處為較易產(chǎn)生非特異性反應??乖蚩贵w包被后,以非離子去污劑無(wú)法有效地封閉未結合蛋白的部位,需使用蛋白作為封閉劑。
2、中結合力
此類(lèi)酶標板經(jīng)表面疏水鍵被動(dòng)與蛋白結合,適合作為分子量>20kD的大分子蛋白的固相載體,其蛋白結合能力為200~300ngIgG/cm2。由于該類(lèi)酶標板所具有的僅與大分子結合的特性,適用于作為未純化抗體或抗原的固相載體,可降低潛在的非特異性交叉反應。
小結:該類(lèi)板可以惰性蛋白或非離子去污劑作為封閉液。
3、氨基化
這種酶標板經(jīng)表面改性處理后擁有帶正電荷的氨基,其疏水鍵由親水鍵取代。該類(lèi)酶標板適合作為小分子蛋白的固相載體。使用合適的緩沖液和pH值,其表面可通過(guò)離子鍵與帶負電荷的小分子結合。由于其表面的親水特性和可通過(guò)其它交聯(lián)劑共價(jià)結合的能力,可用于固定溶于Triton-100、Tween20等去污劑的蛋白分子。
小結:該類(lèi)板的缺陷為由于降低了疏水性,一部分蛋白分子無(wú)法結合;此外其表面需有效地封閉。由于親水和共價(jià)的表面特性,使用的封閉液必須能夠與非反應性氨基基團和所選擇的交聯(lián)劑中任何功能基團發(fā)生作用。