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BUNSEN熱訊:胎牛血清常見(jiàn)問(wèn)題解答

更新時(shí)間:2024-01-24    點(diǎn)擊次數:1831

  BUNSEN熱訊:胎牛血清常見(jiàn)問(wèn)題解答


  Q: 應該如何儲存和解凍血清才不會(huì )使產(chǎn)品質(zhì)量受損?

  A:建議血清應保存在-20°C。若一次無(wú)法用完一瓶,無(wú)菌分裝血清至恰當的滅菌容器內,再放回冷凍。解凍時(shí),建議將血清從冷凍室先移至2-8°C冰箱解凍,再放置于室溫進(jìn)行解凍。請注意,解凍過(guò)程中需要經(jīng)常搖晃混合。BUNSEN不推薦將FBS在37C長(cháng)時(shí)間孵育解凍,胎牛血清。

  Q: 熱滅活是必須的嗎?

  A:實(shí)驗顯示,經(jīng)過(guò)正確處理的熱滅活血清,對大多數的細胞而言是不需要的。經(jīng)此處理過(guò)的血清對細胞的生長(cháng)只有微小的促進(jìn),或沒(méi)有任何作用,甚至通常因為高溫處理影響了血清的質(zhì)量,而造成細胞生長(cháng)速率的降低。而經(jīng)過(guò)熱處理的血清,沉淀物的形成會(huì )顯著(zhù)的增多,這些沉淀物在倒置顯微鏡下觀(guān)察,像是“小黑點(diǎn)",常常會(huì )讓研究者誤以為是血清遭受污染。熱滅活過(guò)程中局部溫度過(guò)高,搖顯不均勻,滅活時(shí)間過(guò)長(cháng),都會(huì )造成血清品質(zhì)下降。若非必須,可以不需要做熱處理這一步。不但節省時(shí)間,更確保血清的質(zhì)量!

  Q: 如何進(jìn)行血清的熱滅活?胎牛血清

  A:滅活之前必須先搖勻解凍的血清并恢復到室溫

  (1)取部分搖勻的血清 (50ML離心管) ,選用同規格的對照管一個(gè)。;

  (2)對照管內放入與血清等體積的水:

  Q: 培養基中添加了血清和抗生素后,可長(cháng)期保存嗎 ?

  A:一旦您在新鮮培養基中添加了血清和抗生素時(shí),您應該在2周內使用它。因為一些抗生素和血清中的基本成分在解凍后就開(kāi)始降解。

  (3)溫度預試:對照管內插入溫度計,顯示56°C時(shí),將恢復到室溫的血清,放入水浴鍋。滅活過(guò)程中,經(jīng)常輕輕晃動(dòng)搖勻 (如: 每隔5MIN),保證溫度均一。

  Q: 細胞培養中出現黑點(diǎn)是污染嗎 ? 如何處理?

  A:一旦您在細胞培養的過(guò)程中發(fā)現有黑點(diǎn)生成,首先,要肉眼觀(guān)察培養基是否混濁,然后,在鏡下觀(guān)察培養細胞生長(cháng)的狀態(tài),黑點(diǎn)是否游動(dòng)。如果細胞被污染,微生物則會(huì )大量繁殖,培養基就會(huì )迅速變黃、變混濁。污染包括細菌污染、支原體污染等。如果在鏡下觀(guān)察細胞,生長(cháng)狀態(tài)良好,與黑點(diǎn)出現前相比,沒(méi)有任何

  變化,那么,黑點(diǎn)的出現可能與以下幾種情況有關(guān):

  (1)細胞生長(cháng)過(guò)老,破碎的細胞殘骸:

  (2)配制培養基的 PH值偏高,不宜細胞生長(cháng):

  (3)培養原代細胞中出現小黑點(diǎn),可能是原代組織中的雜質(zhì),多次傳代可以消除

  (4)血清等級不足以維持細胞良好的生長(cháng)。

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