本生教您怎么識別ELISA試劑盒的真偽?
在國內生物研究蓬勃發(fā)展的現在,無(wú)視科學(xué)研究的嚴謹性和嚴肅性,讓廣大的科研工作者被動(dòng)造假,嚴重破壞了科研氛圍,擾亂了市場(chǎng)秩序,BUNSEN本生整理了一些鑒別這些偽劣ELISA試劑盒的方法,供廣大的科研工作者和用戶(hù)參考,讓希望對廣大科研工作者有所幫助。
購買(mǎi)前
【方法一】向廠(chǎng)家索要或從其網(wǎng)站下載說(shuō)明書(shū),查找ELISA的性能指標:準確度(加標回收率、稀釋線(xiàn)性)、精密度(板內差、板間差)、靈敏度、樣本值、特異性、校準。一般來(lái)說(shuō),除了校準不一定每份說(shuō)明書(shū)都有外,其余的指標一般都需要羅列(部分樣本需要高倍稀釋的,可能沒(méi)有準確度這個(gè)指標)。如果無(wú)法提供這些性能指標,則說(shuō)明該試劑盒可能是假貨,或者試劑盒開(kāi)發(fā)過(guò)程不夠科學(xué)嚴謹,有可能無(wú)法檢測出真實(shí)的樣本值。
【方法二】對于夸大ELISA涵蓋的指標的范圍,尤其是不常見(jiàn)的種屬,可先去國際ELISA試劑盒供應商(如eBioscience、R&D)網(wǎng)站上搜索,如果搜索不到該種屬的ELISA試劑盒,則有可能是假貨,需要小心謹慎。
【方法三】將“廠(chǎng)家名”、“ELISA”和“假貨”等關(guān)鍵詞在網(wǎng)上搜索,有的網(wǎng)站等會(huì )有打假曝光臺。
購買(mǎi)后
【方法一】檢查說(shuō)明書(shū)、包裝盒的質(zhì)量,通常偽劣產(chǎn)品為了降低成本,印刷的質(zhì)量會(huì )比較差。其次仔細閱讀說(shuō)明書(shū),如上所示查找ELISA的性能指標。
【方法二】
?、?利用干擾實(shí)驗即可鑒別ELISA試劑盒是否檢測目的抗原,方法如下:
(1)將針對試劑盒特異性的重組蛋白抗原和試劑盒中的檢測抗體配置成antibody:antigen=1:2的混合孵育液
(2)37℃孵育15分鐘后,代替原試劑盒中的檢測抗體
(3)后續操作按照試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行,加檢測抗體、酶復合物和底物
(4)實(shí)驗完畢后,檢測其標準曲線(xiàn),如果標準曲線(xiàn)良好則說(shuō)明加入的目的抗原和試劑盒抗體不匹配,試劑盒檢測抗體針對的是非目的抗原,該試劑盒為偽劣假造ELISA試劑盒。
(5)如果標準曲線(xiàn)無(wú)線(xiàn)性,則說(shuō)明試劑盒檢測抗體已被目的抗原中和或干擾,影響了其實(shí)際試劑盒抗體的檢測作用,則該試劑盒檢測抗體針對的是目的抗原。
?、?如果購買(mǎi)了兩盒同一公司的ELISA試劑盒A和B,利用交叉實(shí)驗即可鑒別ELISA試劑盒是否造假,方法如下:
(1)取出購買(mǎi)的試劑盒A的包被板兩條。
(2)一條包被板加試劑盒A的標準品做標準曲線(xiàn)。
(3)另一條包被板加試劑盒B的標準品做標準曲線(xiàn)。
(4)后續操作按照試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行,加檢測抗體、酶復合物和底物。
(5)實(shí)驗完畢后,檢測兩條標準曲線(xiàn),如果兩條標準曲線(xiàn)一致則說(shuō)明兩個(gè)ELISA試劑盒檢測的同一個(gè)指標而非A和B,即該試劑盒為偽劣假造ELISA試劑盒。
(6)如果兩條標準曲線(xiàn)不一致則說(shuō)明兩個(gè)ELISA試劑盒檢測的不同指標,試劑盒A只能檢測A,不能檢測B,即該試劑盒為正常的ELISA試劑盒。
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