本生試劑盒—ELISA試劑盒實(shí)驗樣本收集準備小結

　　ELISA試劑盒樣本實(shí)驗準備：

　　在收集樣本前都必須有一個(gè)完整的計劃，必須清楚要檢測的成份是否足夠穩定。對收集后當天就進(jìn)行檢測的樣本，及時(shí)儲存在4℃備用。對于隔天再檢測的樣本，及時(shí)分裝后凍存在-20℃備用，有條件的，-70℃凍存備用。標本應避免反復凍融。

　　液體類(lèi)標本: 包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養上清等。

　　1. 血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應再次離心。

　　2. 血漿：應根據標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應再次離心。

　　3. 尿液：用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。

　　4. 細胞培養上清：檢測分泌性的成份時(shí)，用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。

　　5. 培養細胞：檢測細胞內的成份時(shí)，用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液，細胞濃度達到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復凍融或加入組織蛋白萃取試劑，以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應再次離心。

　　6. 組織標本：切割標本后，稱(chēng)取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存備用。標本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4)，或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。

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