BUNSEN本生:ELISA實(shí)驗疑難問(wèn)題解答
ELISA實(shí)驗做了很多次,可是結果還是有偏差?可能很多同學(xué)都會(huì )出現這樣的問(wèn)題,那么問(wèn)題到底出在哪呢,今天BUNSEN本生小編就來(lái)給大家總結一下,ELISA實(shí)驗中會(huì )經(jīng)常遇見(jiàn)的問(wèn)題。
1.非正常的樣本值
?、俨徽_的收集或保存
解決方案:確保正確的底物體積混合。如果底物是凍干粉,用相應緩沖液重懸*,充分混合并在一定時(shí)間內使用。
?、诓徽_的樣本制備
說(shuō)明書(shū)中樣本制備方法已經(jīng)過(guò)性能測試驗證,嚴格按照說(shuō)明書(shū)推薦進(jìn)行。確保使用正確的校正稀釋液。
2.信號強度增長(cháng)不充分
?、俚孜餃蕚溆姓`
解決方案:確保正確的底物體積并混合。如果底物是凍干粉,用相應緩沖液重懸*,充分混合并在一定時(shí)間內使用。
?、诿靠椎孜锾砑芋w積有誤
解決方案:保證移液器正常工作,必要時(shí)進(jìn)行重新校正。保證移液器吸頭連接緊密。
?、鄯跤龝r(shí)間或溫度有誤
解決方案:嚴格按照推薦的孵育時(shí)間和溫度進(jìn)行實(shí)驗,避免在環(huán)境條件變化的位置孵育96孔板(如放在通風(fēng)處或窗臺邊)。
?、芘悸?lián)物或底物準備有誤
解決方案:確?;旌舷嗤w積的偶聯(lián)物和底物。加入后會(huì )立即顯色。底物在使用前應避光保存。
?、輧x器設置不正確
解決方案:確保酶標儀使用了正確的濾光片,確保按照說(shuō)明書(shū),正確的配置儀器參數。
3.邊緣效應
?、俟ぷ髋_溫度不均衡
解決方案:避免在環(huán)境條件變化的位置孵育,如放在通風(fēng)處或窗臺邊。
?、隗w系液體蒸發(fā)
解決方案:保證移液器正常工作,必要時(shí)進(jìn)行重新校正。保證移液器吸頭連接緊密。
?、郫B板
孵育時(shí)避免疊板。
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