本生知識分享——細胞培養血清的作用及分類(lèi)

　　血清，指血液凝固后，在血漿中除去纖維蛋白分離出的淡黃色透明液體或指纖維蛋白已被除去的血漿。其主要作用是提供基本營(yíng)養物質(zhì)、提供激素和各種生長(cháng)因子、提供結合蛋白、提供促接觸和伸展因子使細胞貼壁免受機械損傷、對培養中的細胞起到某些保護作用。牛血清是細胞培養中用量最大的天然培養基,含有豐富的細胞生長(cháng)必須的營(yíng)養成份,具有極為重要的功能.

　　細胞培養血清的作用：

　　1.在細胞培養中提供對維持細胞指數生長(cháng)的激素,基礎培養基中沒(méi)有或量很少的營(yíng)養物,以及主要的低分子營(yíng)養物.

　　2. 提供結合蛋白,能識別維生素、脂類(lèi)、金屬和其他激素等,能結合或調變它們所結合的物質(zhì)活力.

　　3.有些情況下結合蛋白質(zhì)能與有毒金屬和熱原質(zhì)結合,起到解毒作用.

　　4.在細胞培養中是細胞貼壁、鋪展在塑料培養基質(zhì)上所需因子來(lái)源.

　　5.起酸堿度緩沖液作用.

　　6.提供蛋白酶抑制劑,使在細胞傳代時(shí)使剩余胰蛋白酶失活,在細胞培養中保護細胞不受傷害.

　　血清的類(lèi)別：

　　BUNSEN本生胎牛血清、透析型胎牛血清 、天然低IGG胎牛血清 、干細胞培養胎牛血清 、特殊用途胎牛血清 、活性炭/葡萄糖處理胎牛血清 、胎牛血清替代物 、小牛血清 、新生牛血清 、加強型小牛血清 、補鐵小牛血清 、成牛血清 、供體馬血清 、兔血清 、雞血清 、豬血清 、馬血清 、其他動(dòng)物血清 、合成血清替代品。

　　血清的常見(jiàn)問(wèn)題

　　保存血清的方法?

　　血清應保存在-5C至-2OC。然而，若存放于4C時(shí)，請勿超過(guò)一個(gè)月。若您一次無(wú)法用完一瓶，建議將無(wú)菌分裝血清至恰當的滅菌容器內，再放回冷凍。

　　如何解凍血清才不會(huì )使產(chǎn)品質(zhì)量受損?

　　將血清從冷凍箱取出后，先置于2-8C冰箱使之溶解，然后在室溫下使之全溶。但必須注意的是，溶解過(guò)程中必須規則地搖晃均勻。

　　如何避免沉淀物的產(chǎn)生?

　　1、解凍血清時(shí)，請按照所建議的逐步解凍法(-2O。C至4。C至室溫)，若血清解凍時(shí)改變的溫度太大(如-20。C至37。C)，實(shí)驗顯示非常容易產(chǎn)生沉淀物。

　　2、解凍血清時(shí)，請隨時(shí)將之搖晃均勻，使溫度及成分均一，減少沉淀的發(fā)生

　　3、請勿將血清置于37。C太久。若在37。C放置太久，血清會(huì )變得混濁，同時(shí)血清中許多較不穩定的成分也會(huì )因此受到損害，而影響血清的質(zhì)量。

　　4、血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多，若非必要，可以無(wú)須做此步驟。

　　5、若必須做血清的熱滅活，請遵守56。C，30分鐘的原則，并且隨時(shí)搖晃均勻。溫度過(guò)高，時(shí)間過(guò)久或搖晃不均勻，都會(huì )造成沉淀物的增多。

　　6、血清解凍后發(fā)現有絮狀沉淀物出現，該如何處理?

　　想去除這些絮狀沉淀物，可以將血清分裝至無(wú)菌離心管內，以400g稍微離心，上清液即可接著(zhù)加入培養基內一起過(guò)濾。但不建議以過(guò)濾的方法去除這些絮狀沉淀物，因為它可能會(huì )阻塞過(guò)濾膜。

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