本生課堂：熒光定量PCR(qPCR)檢測服務(wù)(含內參)

　　一、服務(wù)概述

　　實(shí)時(shí)熒光定量PCR(Real Time PCR)技術(shù)，是指在PCR指數擴增期間通過(guò)連續監測熒光信號強弱的變化來(lái)即時(shí)測定特異性產(chǎn)物的量，最后通過(guò)標準曲線(xiàn)對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。熒光定量PCR的熒光檢出方法包括SYBR green(熒光染料摻入法) 和Taqman probe (探針?lè )?兩種方法。

　　二、服務(wù)內容

　　1.從動(dòng)物細胞、人或動(dòng)物組織等樣品中提取核酸;

　　2.對核酸進(jìn)行濃度及純度分析;

　　3.熒光定量PCR檢測;

　　(1)引物和探針的設計與合成;

　　(2)絕對定量和相對定量的選擇;

　　(3)探針?lè )ê腿玖戏ǖ倪x擇;

　　(4)熒光定量PCR儀對目的基因的檢測;

　　(5)數據統計和分析;

　　4.預實(shí)驗服務(wù)：根據客戶(hù)提供的目的基因序列或NCBI序列號提供客戶(hù)引物和探針，并篩選出化的引物和探針;

　　5.正式實(shí)驗服務(wù)：根據預實(shí)驗篩選的引物和探針對所用樣品進(jìn)行熒光定量PCR的檢測，并對結果進(jìn)行統計和分析。

　　三、樣品要求

　　細胞>1×106個(gè);組織>50mg;細菌濕重>50mg

　　項目服務(wù) 內容 周期(工作日)

　　抽提樣品DNA或RNA 細胞樣品 5

　　組織樣品 5

　　引物設計與合成 優(yōu)化引物&探針設計及合成 7

　　優(yōu)化引物設計及合成 5

　　引物合成 3

　　RT反應 mRNA反轉錄成cDNA 5

　　標準曲線(xiàn)制作 相對定量(雙標準曲線(xiàn)法) 5

　　絕對定量

　　熒光PCR檢測 基因 10

　　四、客戶(hù)需提供

　　1.請提供新鮮材料或直接提供已純化的DNA/RNA，確?？偭?gt;5μg/樣品。如果目的基因表達量較低時(shí)，應盡量提供更高濃度的總RNA或DNA;

　　2.請提供已知的全長(cháng)基因序列(GeneBank Accession Number、Gene ID);

　　3.請提供盡可能詳細的背景資料：生物物種信息(Human、Mouse、Rat等)、DNA/RNA來(lái)源、豐度等;

　　4.客戶(hù)可以提供引物，沒(méi)有引物的情況下，本公司幫助設計合成。

　　五、BUSNEN本生提供

　　1.RNA抽提和PCR擴增電泳結果的數碼拍照，定量PCR實(shí)驗結果原始文件及相關(guān)軟件;

　　2.提供實(shí)驗報告，包括實(shí)驗方法、步驟、所用試劑、儀器、數碼照片及相關(guān)分析數據等，如有必要可以協(xié)助客戶(hù)進(jìn)行相關(guān)的數據處理和分析。

　　抗體本生一直視質(zhì)量控制為企業(yè)的生命，追求企業(yè)競爭力的不斷提升。公司在經(jīng)營(yíng)中始終秉承：遵紀守法，嚴于律己，寬仁以待，敢于承擔的企業(yè)精神作為標準，以過(guò)硬的質(zhì)量和優(yōu)良的服務(wù)來(lái)維護和拓展市場(chǎng)，較大限度的滿(mǎn)足客戶(hù)的需求。與客戶(hù)的共贏(yíng)，是我們的發(fā)展目標。本生!您信任的合作伙伴。我們愿與您真誠合作，共創(chuàng )美好的未來(lái)。