本生快訊：Elisa試劑盒實(shí)驗的技巧及注意事項

　　在操作elisa試劑盒實(shí)驗前，不少老師會(huì )找尋很多的相關(guān)實(shí)驗資料，網(wǎng)上的資料一大堆，然而真正所能夠需要用到的技巧和注意也就那幾條，熟練的了解并掌握之后再應用到實(shí)驗中就會(huì )簡(jiǎn)單的多。

　　一、加樣的經(jīng)驗總結

　　加樣或加試劑時(shí)，請注意在吸取標本/標準品，酶結合物或底物時(shí)，個(gè)孔與一個(gè)孔加樣之間的時(shí)間間隔如果太大，將會(huì )導致不同的 “預孵育”時(shí)間，從而明顯地影響到測量值的準確性及重復性。一次加樣時(shí)間控制 在10分鐘內，如標本數量多，推薦使用多道移液器加樣。

　　二、孵育的三條必知

　　1.為防止樣品蒸發(fā)，試驗時(shí)將反應板放于鋪有濕布的密閉盒內，酶標 板加上蓋或覆膜，以避免液體蒸發(fā);

　　2.洗板后應盡快進(jìn)行下步操作，任何時(shí)侯都應避免酶標板處于干燥狀態(tài);

　　3.同時(shí)應嚴格遵守給定的孵育時(shí)間和溫度。

　　三、ELISA洗滌小技巧

　　洗滌過(guò)程中反應孔中殘留的洗滌液應在濾紙上充分拍干，勿將濾紙直 接放入反應孔中吸水，同時(shí)要消除板底殘留的液體和手指印，避免影響*后的酶標儀讀數。

　　四、反應時(shí)間的控制

　　加入底物后請定時(shí)觀(guān)察反應孔的顏色變化(比如，每隔 10分鐘)，如顏色較深，請提前加入終止液終止反應，避免反應過(guò)強從而影響酶標儀光密度讀數。

　　五、操作說(shuō)明

　　1.封板膜只做一次性使用。

　　2.標本中待測物質(zhì)含量過(guò)高時(shí)先將樣本稀釋一定倍數后再測定，計算時(shí)請乘以稀釋倍數。

　　3.各步加樣均使用加樣器，并經(jīng)常校對其正確性，一次加樣時(shí)間控制在5分鐘內(標本數目多的時(shí)候，上海研域推薦使用排槍加樣)。

　　4.液體標本置4℃保存應小于1周，-20℃或-80℃均應密封保存，-20℃不應超過(guò)1個(gè)月，-80℃不應超過(guò)2個(gè)月;標本溶血會(huì )影響檢測結果，因此溶血標本不宜進(jìn)行此項檢測。

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