對于ELISA試劑盒操作程序，本生詳解如下：

1. 分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同)、標準品孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品孔中加入標準品50μl;在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl(樣品最后稀釋度為5倍)。每孔加入酶標試劑50μl，空白孔除外。輕輕晃動(dòng)混勻，37℃溫育60分鐘。

   
   

   

　　2. 棄去液體，甩干，每孔加滿(mǎn)稀釋后洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。如此重復5次，拍干。

　　3. 每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.

　　4. 取出酶標板，每孔加終止液50μl，終止反應(此時(shí)藍色立轉黃色)。

　　5. 測定：以空白孔調零，在450nm波長(cháng)下測量各孔的吸光度值(OD值)。測定應在加終止液后15分鐘以?xún)冗M(jìn)行。

　　6. 根據elisa試劑盒免費代測標準品的濃度及對應的OD值計算出標準曲線(xiàn)的直線(xiàn)回歸方程，再根據樣品的OD值在回歸方程上計算出對應的樣品濃度。也可以使用各種應用軟件來(lái)計算。應記住由于樣品稀釋了的，其實(shí)際濃度應該乘以總稀釋倍數。

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