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本生快訊——DAB染色液的使用方法及注意事項

更新時(shí)間:2023-03-27    點(diǎn)擊次數:2281

  本生快訊——DAB染色液的使用方法及注意事項


  DAB染色液用于免疫組化染色,應用在Dako 自動(dòng)染色系統上。

  DAB染色液的使用方法

  1.DAB顯色液配制

  10mM Tris-HCl (pH7.6) 9mL +DAB (diaminobezidin 3,3-二氨基聯(lián)苯胺) +0.3%(W/V) NiCl2 或CoCl2 1mL ,顯色時(shí)加入5-10mL 30%H2O2 混勻后立即使用

  2. 顯色

  準備好含有待測蛋白的固相膜:包括電泳、轉印、封阻、一抗(或生物素)處理、辣根過(guò)氧化酶(HRP)標記的二抗(或鏈霉親和素)處理、清洗等步驟。

  3.加入適量的DAB顯色液,鋪滿(mǎn)整個(gè)固相膜表面(可按比例增減)。

  4. 置于平式搖蕩儀上,在室溫下孵育2至5分 鐘,避免光照(暗室操作),直至棕褐色沉淀出現。

  5.用鑷子夾起固相膜,放進(jìn)無(wú)離子水里清洗。

  6.空氣中晾干。

  7. 拍照記錄 。

  DAB染色液的注意事項

  1. DAB溶液應低溫密封保存。如有結晶析出,應確保結晶溶解再行使用;

  2. 顯色工作液應現用現配,新鮮配制的工作液應為無(wú)色或淺棕色,如顏色過(guò)深,請勿使用;

  3. DAB在常溫下不穩定,每次取用后均應及時(shí)加蓋密封放回冰箱,以免因DAB分解影響實(shí)驗,或因滲漏造成實(shí)驗環(huán)境污染;

  4. DAB有潛在致突變作用,操作時(shí)應注意穿戴好防護用具。

  DAB染色液本生公司產(chǎn)品種類(lèi)已超過(guò)萬(wàn)種,正廣泛應用于科研院校、中心實(shí)驗室、分子生物學(xué)等科研域。公司豐富的產(chǎn)品既能滿(mǎn)足研發(fā)類(lèi)客戶(hù)對產(chǎn)品種類(lèi)、包裝的特殊要求,也能滿(mǎn)足生產(chǎn)型企業(yè)從小試、中試到規?;a(chǎn)各個(gè)階段的綜合需求。


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