本生PCR板—96孔板鋪板的小技巧

　　96孔板進(jìn)行鋪板的?當細胞用96孔板接種時(shí)，細胞經(jīng)常是不均勻分布。第二天就會(huì )發(fā)現有些地方出現堆積性生長(cháng)，而還有不少地方細胞則很稀疏，細胞密集的地方因細胞與細胞之間的接觸抑制影響細胞的生長(cháng)，這樣就很難評價(jià)干預因素對細胞的作用。因此，將96孔板種均勻也是進(jìn)行后續實(shí)驗的將以用的老辦法和用的新方法比較一下，以讓大家看看各自?xún)?yōu)缺。

　　1、老方法：植板后，用手拿起96孔板，左右搖動(dòng)，然后來(lái)回搖動(dòng)幾次，但這種方法通常在2-3個(gè)細胞的5口井中分布不均勻。  在大多數情況下，中間的孔會(huì )出現成堆的分布，會(huì )讓人感到一陣麻煩。 再一次，看到一位老師將電路板放在振動(dòng)器上并搖動(dòng)幾分鐘。 結果更糟。 細胞都在中間。

　　通常，會(huì )在96孔板的每個(gè)孔上，加入100微升的細胞懸浮液。把它從左邊加到洞底。加入一半板材后，與未加入的細胞懸浮液混合，然后繼續加入剩余的一半板材。蓋上蓋子后，用左手輕輕握住木板的左邊，然后用右手輕拍木板的右邊緣。注意力集中在力量上(通常敲擊它三次)。太多或太多次會(huì )導致細胞堆積。順時(shí)針轉動(dòng)盤(pán)子(逆時(shí)針?lè )较虿缓?  ，將剩下的三面逐一拍打，靜置5分鐘左右，然后放入37度的培養箱中。本生熒光定量PCR板

　　2、新方法：這種方法是非常好，非常均勻播種。使用等速吸引吸取細胞，然后吸移嘴對孔(注意尖不接觸孔槍頭底部)的側壁上，然后再慢慢敲除細胞吸管定植后，不要搖晃板，它只是可以直接在顯微鏡下被放置，這個(gè)方法可以被說(shuō)成是有效的。

　　補充：從6孔板到96孔板，細胞應均勻分布分散。用培養基進(jìn)行稀釋細胞，然后將培養板放置在適當的位置。添加一個(gè)細胞時(shí)和之后，請勿移動(dòng)能力培養板;如果在空氣中沒(méi)有介質(zhì)吹入，但是不要移動(dòng)培養板，加入細胞后，靜置20-30分鐘，然后可以將其移入培養箱。這樣，細胞結構通常具有均勻生長(cháng)。當然，提是細胞消化系統良好。

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