本生技術(shù)分享—如何區別真假胎牛血清

　　一、外觀(guān)

　　拿到血清，最先接觸的是血清外觀(guān)，對于缺缺少細胞培養經(jīng)驗的人來(lái)說(shuō)，外觀(guān)的判斷尤為重要

　　1、顏色

　　根據血紅蛋白含量的不同，胎牛血清可表現出黃色或紅色，我國的細胞培養用血清標準是不高于20mg/dl，實(shí)際上，血紅蛋白含量的高低對血清并無(wú)直接影響，這個(gè)指標的意義在于能體現出采血過(guò)程的嚴謹規范程度，良好的操作能降低血清的溶血。

　　本生胎牛血清 國產(chǎn)血清的采血點(diǎn)很分散，大多是由屠戶(hù)采血后馬上離心收集，所以很少會(huì )有溶血，表現出明亮的蠟黃色，當然，國產(chǎn)血清也很少有標準意義上的胎牛血清。

　　進(jìn)口胎牛血清或多或少總有點(diǎn)溶血，因為真正的胎牛血清凝血功能差，紅細胞容易破裂。

　　總的來(lái)說(shuō)，國產(chǎn)的血清呈現出蠟黃。進(jìn)口的血清，的呈現出談黃、微紅色，差點(diǎn)的呈現出橘紅色或鮮紅色。當然，熱滅活血清或保存不當的血清，由于血紅蛋白的破壞氧化，會(huì )呈現出暗紅，甚至咖啡色。

　　2、沉淀

　　很多血清客戶(hù)，會(huì )發(fā)現進(jìn)口血清有沉淀，從而懷疑血清的質(zhì)量問(wèn)題，這是沒(méi)有根據的。

　　血清中的沉淀是由纖維蛋白的凝聚產(chǎn)生，對血清質(zhì)量沒(méi)有任何影響，沉淀的產(chǎn)生原因很多，和廠(chǎng)家的加工生產(chǎn)方式密切相關(guān)。

　　國產(chǎn)血清，大多來(lái)自北方，由于價(jià)格低廉，保存環(huán)境都不好，從采血、冷凍、運輸到生產(chǎn)會(huì )經(jīng)過(guò)多次凍融，每次凍融過(guò)程，就會(huì )析出部分纖維蛋白沉淀，這樣，血清成品過(guò)濾后看起來(lái)反而更加的“干凈"，很少有沉淀產(chǎn)生。

　　進(jìn)口的胎牛血清，過(guò)濾分裝前很少會(huì )反復凍融，生產(chǎn)后的成品也是清澈的，但隨著(zhù)時(shí)間的推移，血清中的大量纖維蛋白會(huì )析出形成沉淀。當然，進(jìn)口的新生牛血清，一般牛齡都在2周左右，血清中的各種蛋白含量明顯偏高，生產(chǎn)后血清可能會(huì )渾濁，甚至有大量沉淀。

　　當然，購買(mǎi)回來(lái)的血清都是冰凍狀態(tài)，使用時(shí)需要融化，融化過(guò)程最好在溫度較低的狀態(tài)下慢慢進(jìn)行，否則沉淀相對較多，雖然沉淀并不直接影響血清的質(zhì)量，但對細胞的顯微觀(guān)察有一定的阻礙。

　　3、澄清度

　　進(jìn)口胎牛血清由于蛋白和脂類(lèi)等物質(zhì)含量低，表現為稀薄、清淡，而國產(chǎn)血清，因為絕大多數是新生牛血清，相對而言更加粘稠，顏色略深，這對于初步接觸血清的人很難判斷，但把兩者進(jìn)行對比，可容易分辨。

　　二、主要技術(shù)指標

　　目前國內血清的質(zhì)量標準是2005版的《中華人民共和國藥典》，主要指標有以下幾點(diǎn)：

　　1、內毒素

　　標準為不高于5EU/ml。內毒素是細菌破碎后細胞壁的成分，因此內毒素含量的高低可表現出采血到生產(chǎn)一系列過(guò)程中的無(wú)菌操作情況。目前，國產(chǎn)血清基本都能達到這一要求，很多進(jìn)口胎牛血清內毒素含量反而更高，只要求不高于50EU/ml，高出我國標準10倍?？梢?jiàn)，內毒素含量偏高不影響質(zhì)量，除非含量，預示著(zhù)已經(jīng)污染。

　　2、總蛋白含量

　　胎牛血清一般范圍是30-40mg/ml，數值偏高，說(shuō)明采血的牛齡偏大，不是胎牛，數值偏低，表明血清可能摻水了。

　　3、血紅蛋白

　　標準為不高于20mg/dl，顏色越紅，數值越高，反之，數值越低。

　　4、pH

　　國產(chǎn)血清，大多高于7.5，進(jìn)口胎牛血清，大多低于7.5，具體原因未知，可能和牛齡有關(guān)，這也能用來(lái)初步鑒別血清的來(lái)源。

　　5、微生物

　　包括細菌、霉菌、支原體、噬菌體、各類(lèi)病原性病毒等。隨著(zhù)國內血清廠(chǎng)家生產(chǎn)條件的改善提高，細菌、霉菌等“大型"微生物幾乎能100%控制，支原體經(jīng)過(guò)0.1um過(guò)濾，大多也能清除。大腸桿菌噬菌體的污染還是比較嚴重的，主要是生產(chǎn)環(huán)境過(guò)程中帶入，又無(wú)法過(guò)濾，很難清除，但對血清質(zhì)量影響不大。病原性病毒，特別是BVDV，在國產(chǎn)血清中幾乎90%以上都存在，這類(lèi)微生物是影響國產(chǎn)血清質(zhì)量的重要因素之一，而進(jìn)口胎牛血清中基本都控制的很好。

　　6、免疫球蛋白

　　國產(chǎn)血清的只是定性檢測，結果也很不準確，進(jìn)口胎牛血清大多定量檢測。免疫球蛋白的數值能體現出采血的時(shí)的牛齡情況，國產(chǎn)血清，基本都是新生牛的，血清中容易產(chǎn)生IgM，IgG的含量也偏高，進(jìn)口胎牛血清，本生胎牛血清不含IgM，IgG的含量也較低。

　　7、其它

　　不管是國產(chǎn)還是進(jìn)口血清，都是不測抗生素的(無(wú)四環(huán)素胎牛血清除外)。國外，抗生素的使用很?chē)栏?，用量也很少，每頭奶牛的產(chǎn)品包括血清都可以溯源的，因此可以做到胎牛血清中不含抗生素或含量極低;國內，抗生素的濫用已成了普遍現象，血清中殘留很高，對細胞培養極為不利，這是國產(chǎn)血清質(zhì)量差的根本原因。

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