本生闡述：細胞凍存管的使用步驟及常見(jiàn)問(wèn)題

　　凍存管一般用作實(shí)驗室細胞的低溫保藏。凍存管又名冷凍管，是常用的實(shí)驗耗材，多用于生物、醫藥、食品等行業(yè)。

　　凍存管介紹：

　　凍存管一般按容量劃分為0.5ml，1.0ml，1.5ml，1.8ml，2.0ml，4ml，5ml，7ml，10ml等。一般的凍存管不能進(jìn)入液氮里，只有特殊材料處理的才可以放入。同時(shí)凍存管還有雙層的和無(wú)雙層的帶硅膠墊和沒(méi)有硅膠墊的等種種，還有無(wú)色和雜色及各種純色等不同。如果需要進(jìn)入液氮保藏的就要選擇密封的耐低溫的專(zhuān)用凍存管，還要認清所購買(mǎi)的凍存管是否是無(wú)菌以及無(wú)DNA,RNA。

　　凍存管的使用步驟：

　?、?從細菌純培養物中挑取新鮮培養物配成大約為3-4麥氏比濁度的菌懸液接種與菌種保存管中。

　?、?擰緊保存管，來(lái)回顛倒4-5次使細菌乳化，不能旋搖。

　?、?把保存管放入冰箱保存(-20℃--70℃)

　　凍存管的常見(jiàn)問(wèn)題：

　　1、問(wèn)：Nunc凍存管可以滅菌嗎?

　　答：雖然凍存管使用聚yixi材料制造，但是我們不推薦客戶(hù)滅菌。

　　2、問(wèn)：凍存管內旋蓋和外旋蓋有什么區別?

　　答：內旋凍存管為氣相液氮氣相中凍存樣品而設計，管口硅膠墊增強了凍存管的密封性;外旋凍存管為機械設備如冰箱中凍存樣品而設計，外旋蓋的螺紋蓋可以降低處理樣品時(shí)的污染幾率。

　　3、問(wèn)：Nunc的凍存管可以浸入液氮(液相)中凍存樣品嗎?

　　答：Nunc的內旋凍存管可以在液氮中儲存，由于硅膠墊增強密封性。但超低溫度下，任何的密封材料都變得異常脆弱，理論上只要是機械密封就存在泄漏的危險，為了防止泄漏產(chǎn)品的危險，機械密封的凍存管必須密封在保護袋中。Nunc提供CryoFlex 密封管，熱密封的聚yixi管專(zhuān)門(mén)為Nunc凍存管密封設計。將凍存管在液氮液相中凍存而沒(méi)有使用CryoFlex 密封管是十分危險的，凍存管在液氮液相中凍存必須使用CryoFlex 密封管進(jìn)行熱密封。

　　4、問(wèn)：當凍存管儲存在液氮液相中而沒(méi)有使用CryoFlex Tubing 時(shí)，如何正確的溶解復蘇細胞?

　　答：在整個(gè)操作過(guò)程中必須穿戴保護服，包括手套，臉罩等。凍存管從液氮液相取出后必須在液氮氣相中儲存24h，這樣可以使得液氮從凍存管中慢慢的蒸發(fā)和逃逸，從而降低凍存管中的壓力。等在液氮氣相儲存24h后，將凍存管放入水浴槽，同時(shí)用毛巾覆蓋，等熔融復蘇結束后轉移凍存物。

　　5、問(wèn)：使用CryoFlex 密封管時(shí)需要熱密封，這會(huì )不會(huì )影響細胞活性?

　　答：將樣品加入凍存管以前需要將凍存管置于4℃ 冰浴槽。

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